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新鮮組織塊、蠟缺及組織切片均能提供DNA模板用於DNA多態性分析
新鮮組織塊、蠟缺及組織切片均能提供DNA模板用於DNA多態性分析
 

DNA分析

    新鮮組織塊、蠟缺及組織切片均能提供DNA模板用於DNA多態性分析。

    1.組織的DNA提取新鮮組織或冷凍組織,常規用酚三氯甲烷抽提.檢材量少

時直接用Chelex-100提取,提取液中需加入適量蛋白酶K,以保證組織被完全消化。

腐敗組織一般都喪失了DNA分型檢測的條件,盡可能地選擇腐敗較輕的組織,先用

酚三氯甲烷抽提,待DNA沉澱後再用Chelex-IOO提取一次,以消除某些幹擾PCR

增的物質。紺織切片或蠟塊,需用辛烷或二甲苯、元水乙醇脫蠟後按新鮮組織的提取

方法提取DNAEF酸固定的組織塊,蛋白質凝固變性,提取DNA比較困難,消化時

需增加蛋白酶K的用量並延長消化時間。甲醛能抑製DNA聚合酶的活性,用酚三

氯甲烷{DNA後,再用Chelex-IOo提取一次,這樣可以提高檢出率-

    2DNA分型擴增片段長度多態性分析提取得組織的DNA後,可根據案情

需要和比對樣本的情況選擇分型方法,如長度多態性中的STR分型,又如序列多

態性中的HLA基因分型與mtDNA測序。

 

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